Red/ET permet la modification facile du génome de E. coli:
•Interruption de gènes, délétion ou insertion
•Rapporteur de gène, Intégration de tag
•Accord de Promoteur
•Introduction de points de mutations

Kits de Recombinaison Red/ET

Pour l’ingénierie génétique des constructions faite en chaîne des animaux modèles, Red/ET permets:
•le Knock-out / Knock-in conditionnel
•la Fusion de rapporteur ou Promoteur
•la Permutation d’Exon
•l’Introduction de points de mutations

Kits de Recombinaison Red/ET

CASSETTES de SELECTION Gene Bridges
Modification des Marqueurs de Sélection

Des cassettes de sélection accessoires sont également disponibles. Elles sont conçues pour une utilisation en Eucaryotes ou Procaryotes, et certaines sont flanquées par des sites loxP ou FRT. Ces sites permettent la soustraction du marqueur de sélection par une étape de Cre-recombinase ou FLP-recombinase, si nécessaire.

Les cassettes peuvent être très utiles pour générer des constructions-cibles chez les mammifères, ou pour introduire des séquences sans laisser de marqueur de sélection.

Cassettes de Sélection

Les plasmides et souches disponibles sont très utiles pour vérifier la fonctionnalité des sites loxP ou FRT dans une construction d’ADN ou pour exciser les parties droites flanquantes d’ADN loxP ou FRT (comme les marqueurs de sélection) :

Les plasmides sont facilement transformés dans les cellules, ce qui active la recombinase in vivo.
Les souches E.coli peuvent être utilisées en tant que souches délétantes dans laquelle l’ADN peut être transformé.

Plasmides et Souches

La recombinaison Red/ET Gene Bridges permet de faire des modifications plus rapides, plus flexibles et hautement fiables des plasmides, des BAC ou du génome de E. coli en comparaison avec les méthodes de clonage conventionnelles.
Red/ET exploite le potentiel de recombinaison homologue du Phage I pour une ingénierie génétique in vivo dans E. coli.

Du fait que Red/ET ne dépend pas des enzymes de restriction, des réactions de ligation ou des étapes de nettoyage in vitro, elle est fortement applicable pour l’ingénierie des grandes molécules d’ADN.

La recombinaison Red/ET Gene Bridges est un outil puissant pour l'ingénierie de l'ADN dont les principaux domaines d'application sont :
- le clonage rapide et peu coûteux de vecteurs sur mesure pour la production de souris transgéniques: souris "knock-out", souris "knock-in", modèles d'humanisation, échange d'exons... 
- la modification du génome d'E. coli ou d'autres bactéries ("White Biotechnologie").
Les Avantages:
- indépendance par rapport aux sites de restriction
- modification à la base exacte
- pas de limite de taille de la molécule d'ADN à modifier
- rapidité
- pas de mutations non désirées

• Seulement 50bp de séquence flanquante sont suffisantes pour la recombinaison
• Indépendant de la séquence
• Précision à n’importe quelle position
• Clonage sans enzymes de restriction
• Pas de réaction de ligation
• Clonage d’inserts de plus de 80 kb

Les cellules exprimant les gènes dérivés du plasmide pRed/ET favorisent l'échange précis de base des séquences d'ADN flanqués de bras homologues. La réaction in vivo est catalisée par l’exonucléase Reda et la protéine Redb.
Même les tâches les plus exigeantes peuvent être réduites à trois étapes de base:
   1. Attachement des bras d’homologie
   2. Recombinaison
   3. Sélection / Criblage

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GENE BRIDGES